Hvis din læge har anbefalet en karyotype test for dig eller dit barn eller efter en amniocentese, hvad indebærer denne test? Hvilke forhold kan en karyotype diagnosticere, hvad er de trin, der er involveret i testen, og hvad er dens begrænsninger?
Hvad er en karyotype test?
En karyotype er et fotografi af kromosomerne i en celle. Karyotyper kan tages fra blodlegemer, føtale hudceller (fra fostervand eller placenta) eller knoglemarvsceller. Hvilke betingelser kan diagnosticeres med en karyotype-test?
Karyotyper kan bruges til at screene for og bekræfte kromosomale abnormiteter som Downs syndrom, og der er flere forskellige typer af abnormiteter, der kan påvises.
En af disse er trisomier, hvor der er tre kopier af en af kromosomerne i stedet for to. I modsætning hertil forekommer monosomier, når kun en kopi (i stedet for to) er til stede. Udover trisomier og monosomier er der chromosom deletioner, hvor en del af et kromosom mangler, og kromosomtranslokationer, hvor en del af et kromosom er knyttet til et andet kromosom (og omvendt i afbalancerede translokationer.)
Eksempler på trisomier indbefatter:
Down syndrom (trisomi 21)
- Edward syndrom (trisomi 18)
- Patau syndrom (trisomi 13)
- Klinefelters syndrom (XXY og andre variationer) – Klinefelters syndrom forekommer hos 1 ud af 500 nyfødte mænd og ser ud til at være stigende i forekomsten
- Triple X syndrom (XXX)
- Et eksempel på en monosomi omfatter:
Turners syndrom (X0) eller monosomi X – Omkring 15 procent af miskarriere skyldes Turners syndrom, men denne trisomi er kun til stede i ca. 1 i 2000 levende fødsler.
- Eksempler på kromosomal sletninger inkluderer:
Cri-du-Chat syndrom (manglende kromosom 5)
- Williams syndrom (manglende kromosom 7)
- Translocations – Der er mange eksempler på translokationer, herunder transloca tion Down syndrom. Robertsonian translokationer er ret almindelige, forekommer hos ca. 1 ud af 1000 personer.
Mosaicisme er en tilstand, hvor nogle celler i kroppen har en kromosomal abnormitet, mens andre ikke gør det. For eksempel mosaik Down syndrom eller mosaik trisomi 9. Fuld trisomi 9 er ikke kompatibel med livet, men mosaik trisomi 9 kan resultere i en levende fødsel.
(Et eksempel er tusind ord værd. Lær om forskellene mellem translokation, trisomi og mosaik Down syndrom.)
Når er en karyotype klar?
Der er mange situationer, hvor en karyotype kan anbefales af din læge. Disse kan omfatte:
Spædbørn eller børn, der har medicinske tilstande, hvilket tyder på en kromosomal abnormitet, der endnu ikke er diagnosticeret.
- Voksne, der har symptomer, der tyder på en kromosomal abnormitet (for eksempel mænd med Klinefelter’s sygdom kan gå udiagnosticeret indtil puberteten eller voksenalderen.) Nogle af de mosaiske trisomiforstyrrelser kan også gå uden diagnose.
- Infertilitet – En genetisk karyotype kan gøres for infertilitet. Som nævnt ovenfor kan nogle kromosomale abnormiteter gå udiagnosticeret til voksenalderen. En kvinde med Turners syndrom eller en mand med en af varianterne af Klinefelter er måske ikke opmærksom på tilstanden, før de er i stand til at klare infertilitet.
- Prænatal test – I nogle tilfælde, som f.eks. Translokations Down syndrom, kan tilstanden være arvelig, og forældre kan testes, hvis et barn er født med Downs syndrom. (Det er vigtigt at bemærke, at det meste af tiden Down syndrom ikke er en arvelig sygdom, men snarere en chancemutation.)
- Stillbirth – En karyotype gøres ofte som en del af testen efter en dødsfald.
- Tilbagevendende aborter – En forældrenes karyotype af tilbagevendende aborter kan give tegn på årsagerne til disse ødelæggende tilbagevendende tab. Det antages, at kromosomale abnormiteter, såsom trisomi 16, er årsagen til mindst 50 procent af miskarrierer.
- Leukæmi – Karyotype-test kan også gøres for at hjælpe med at diagnosticere leukæmier, for eksempel ved at kigge efter Philadelphia-kromosomet, der findes hos nogle mennesker med kronisk myelogen leukæmi eller akut lymfocytisk leukæmi.
- Trin involveret i en karyotype-test
En karyotype-test kan lyde som en simpel blodprøve, hvilket får mange til at undre sig over, hvorfor det tager så lang tid at få resultaterne. Denne test er faktisk ret kompleks efter indsamling. Lad os tage et kig på disse trin, så du kan forstå, hvad der sker i løbet af den tid, du venter på testen.
1. Prøvesamling
Det første trin i at udføre en karyotype er at indsamle en prøve. Hos nyfødte indsamles en blodprøve indeholdende røde blodlegemer, hvide blodlegemer, serum og andre væsker. En karyotype vil blive udført på de hvide blodlegemer, som aktivt deles (en tilstand kendt som mitose). Under graviditeten kan prøven enten være fostervæske opsamlet under en amniocentese eller et stykke af moderkagen opsamlet under en chorionisk villi-prøveudtagningstest (CVS). Fostervæsken indeholder fosterskindceller, der bruges til at generere en karyotype.
2. Transport til laboratoriet
Karyotyper udføres i et specifikt laboratorium kaldet et cytogenetiklaboratorium – et laboratorium, der studerer kromosomer. Ikke alle hospitaler har cytogenetiklaboratorier. Hvis dit hospital eller medicinsk anlæg ikke har sit eget cytogenetiklaboratorium, sendes testprøven til et laboratorium, der specialiserer sig i karyotypeanalyse. Prøveprøven analyseres af specialuddannede cytogenetiske teknologer, Ph.D. cytogenetikere eller medicinske genetikere.
3. Separation af cellerne
For at analysere kromosomer skal prøven indeholde celler, der aktivt deles. I blodet deles de hvide blodlegemer aktivt. De fleste fosterceller dividerer også aktivt. Når prøven når cytogenetiklaboratoriet, adskilles de ikke-opdelte celler fra de opdelte celler ved hjælp af specielle kemikalier.
4. Voksende celler
For at få nok celler til at analysere dyrkes de opdelte celler i specialmedier eller en cellekultur. Dette medium indeholder kemikalier og hormoner, der gør det muligt for cellerne at opdele og formere sig. Denne proces med dyrkning kan tage tre til fire dage for blodceller og op til en uge for fosterceller.
5. Synkroniserende celler
Chromosomer er en lang streng af humant DNA. For at se kromosomer under et mikroskop skal kromosomer være i deres mest kompakte form i en fase af celledeling (mitose) kendt som metafase. For at få alle cellerne til denne specifikke fase af celledeling, behandles cellerne med et kemikalie, der stopper celledeling ved det punkt, hvor kromosomerne er mest kompakte.
6. Frigørelse af kromosomer fra deres celler
For at se disse kompakte kromosomer under et mikroskop skal kromosomerne være uden for de hvide blodlegemer. Dette gøres ved at behandle de hvide blodlegemer med en særlig løsning, der får dem til at briste. Dette gøres, mens cellerne er på en mikroskopisk dias. De resterende rester fra de hvide blodlegemer vaskes væk, idet kromosomerne sidder fast på objektglasset.
7. Farvning af kromosomer
Kromosomer er naturligt farveløse. For at fortælle et kromosom fra et andet, påføres et specielt farvestof, der hedder Giemsa-farvestof, på diaset. Giemsa farvestof pletter regioner af kromosomer, der er rig på baserne adenin (A) og tymin (T). Når farvet er, ser kromosomerne ud som strenge med lyse og mørke bånd. Hvert kromosom har et specifikt mønster af lys og mørke bånd, som gør det muligt for cytogenetikeren at fortælle et kromosom fra et andet. Hvert mørkt eller lyst band omfatter hundreder af forskellige gener.
8. Analyse
Når kromosomer er farvet, sættes glideren under mikroskopet til analyse. Der tages derefter et billede af kromosomerne. Ved afslutningen af analysen bestemmes det totale antal kromosomer, og kromosomerne arrangeres efter størrelse.
9. Tælle kromosomer
Det første trin i analysen tæller kromosomerne. De fleste mennesker har 46 kromosomer. Mennesker med Downs syndrom har 47 kromosomer. Det er også muligt for folk at have manglende kromosomer, mere end et ekstra kromosom eller en del af et kromosom, der enten mangler eller duplikeres. Ved at se på kun antallet af kromosomer er det muligt at diagnosticere forskellige tilstande, herunder Downs syndrom.
10. Sortering af kromosomer
Efter at have bestemt antallet af kromosomer, begynder cytogenetikeren at sortere kromosomerne. For at sortere kromosomerne vil en cytogenetisk sammenligne kromosomlængde, placeringen af centromerer (de områder, hvor de to kromatider er forbundet) og placeringen og størrelserne af G-båndene. Kromosomparene er nummereret fra største (nummer 1) til mindste (nummer 22). Der er 22 par kromosomer, der kaldes autosomer, som matcher nøjagtigt. Der er også sexkromosomer, hunner har to X-kromosomer, mens mænd har en X og en Y.
11. Kig på strukturen
Ud over at se på det samlede antal kromosomer og kønskromosomerne, vil cytogenetikeren også se på strukturen af de specifikke kromosomer for at sikre, at der ikke er manglende eller yderligere materiale samt strukturelle abnormiteter som translokationer. En translokation sker, når en del af et kromosom er knyttet til et andet kromosom. I nogle tilfælde byttes to kromosomer af kromosomer (en afbalanceret translokation) og andre gange tilføjes et ekstra stykke eller mangler alene fra et enkelt kromosom.
12. Det endelige resultat
Til sidst viser den endelige karyotype det samlede antal kromosomer, kødet og eventuelle strukturelle abnormiteter med individuelle kromosomer. Et digitalt billede af kromosomerne genereres med alle de kromosomer, der er arrangeret efter nummer.
Grænser for karyotype-test
Det er vigtigt at bemærke, at mens karyotype-test kan give meget information om kromosomer, kan denne test ikke fortælle dig, om specifikke genmutationer, som dem, der forårsager cystisk fibrose, er til stede. Din genetiske rådgiver kan hjælpe dig med at forstå begge, hvilke karyotype-test der kan fortælle dig, og hvad de ikke kan. Yderligere undersøgelser er nødvendige for at evaluere den mulige rolle genmutationer i sygdom eller misforståelser.
Det er også vigtigt at bemærke, at karyotypeprøver måske ikke kan opdage nogle kromosomale abnormiteter, som når placenta mosaik er til stede.
Fremtiden
På nuværende tidspunkt er karyotypeprøvning i prænatal indstilling ret invasiv, hvilket kræver amniocentese eller chorionisk villusprøveudtagning. Undersøgelser er i gang med at evaluere cellefri DNA i en mors blodprøve som et langt mindre invasivt alternativ til prænatal diagnose af genetiske abnormiteter hos et foster.
Bundlinje på venter på dine karyotyperesultater
